来源:72886必赢欢迎光临 发布时间:2020-06-03 浏览次数:745

课程名称:兽药残留分析课程实验 

英文名称:Analytical Techniques of Veterinary Drug Residues Experiment

课程总学时:48                    实验学时:32

课程总学分:3

适用专业:动物医学

 

一、课程性质与任务(100300)

《兽药残留分析》是72886必赢网址人才培养方案中专业课程之一。课程实验内容包括动物样品(或动物源食品样品)的采集与处理,HPLCLC-MS等大型精密分析仪器在残留分析中的应用操作,免疫分析技术在残留分析中的应用操作;我国现行动物源食品兽药或有害物质检测标准的解析与实际操作。

二、教学目的与要求(600字以内)

通过课程实验环节,使学生掌握HPLCLC-MS等精密分析仪器在动物样品分析中的实际操作,掌握免疫分析技术(胶体金、ELISA等技术)及不同制品的应用操作,掌握动物样品、食品样品的采集与预处理原理和操作实践。掌握我国现行的动物源食品残留检测标准的具体操作。

三、实验项目设置

(一)实验一:体内药物分析的基本操作技术(动物样品采集)

1、实验类型:演示型、实践教学。

2、实验学时数:6

3、实验目的

1掌握生物样品的种类、采集、制备、保存。

2掌握样品的前处理方法。

4、实验内容

1实验动物(猪)的保定。

2全血、血浆、血清样品的采集、制备、保存。

5、实验要求

1认真观察记录操作过程

2报告时间:实验后1周上交实验报告

3思考、讨论内容:基本操作过程中应注意的问题。观察并记录不同种类血样的外观、颜色。抗凝剂的使用对研究工作的影响。

6、实验仪器设备

实验动物。离心机、摇床、旋转蒸发仪、氮吹仪等。

 

(二)实验二:体内药物分析的基本操作技术(动物样品前处理技术)

1、实验类型:演示型、实践教学

2、实验学时数:6

3、实验目的

1掌握血浆样品的前处理方法。

2了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义。

3比较不同蛋白沉淀剂的沉淀效率。

4、实验内容

1分别采用4种不同类型的试剂(与水相混溶的有机溶剂、中性盐、强酸和重金属盐类)沉淀、除去血浆样品中的蛋白质。

2操作中注意观察不同类型的试剂沉淀蛋白质的效果,并采用高效液相色谱法对实验结果进行分析。

5、实验要求

1认真观察记录操作过程。

2报告时间:实验后1周上交实验报告。

3思考、讨论内容:基本操作过程中应注意的问题;不同蛋白质沉淀剂的沉淀效果、优缺点、对样品进一步处理的影响。

6、实验仪器设备

高速离心机、摇床、旋转蒸发仪、氮吹仪等。

 

(三)实验三:动物组织中氟喹诺酮类药物多残留分析

1、实验类型:综合性、验证型

2、实验学时数:

3、实验目的

1了解高效液相色谱的工作原理。

2掌握动物组织中氟喹诺酮类药物的提取和检测方法。

4、实验内容

1样品中药物的提取、净化。

2HPLC工作原理、仪器工作站了解、操作演示。

3高效液相色谱荧光法同时分析组织样品中诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星的含量。

5、实验要求

1认真观察记录操作过程,规范仪器操作规程。

2报告时间:实验后1周上交实验报告。

3讨论内容:影响氟喹诺酮类药物回收率的因素、标准曲线的绘制与药物浓度定量

6、实验仪器设备

固相萃取装置、旋转蒸发仪、氮吹仪、高效液相色谱仪。

 

(四)实验四:生物样品中克伦特罗等β-受体激动剂类的免疫分析法

1、实验类型:综合性、验证型

2、实验学时数:6

3、实验目的

1了解免疫分析法检测生物药物浓度的工作原理、特性。

2掌握生物样品中克伦特罗等β-受体激动剂类的免疫分析方法。

4、实验内容

1样品中药物的提取、净化。

2免疫分析方法操作。

3结果观察、比较,对免疫分析方法特性的了解,与仪器分析方法的比较。

5、实验要求

1认真观察记录操作过程。

2报告时间:实验后1周上交实验报告。

3讨论内容:影响免疫分析结果的因素

6、实验仪器设备

酶标仪、克伦特罗检测试剂盒(或胶体金试纸条、检测板)、高效液相色谱仪等。

 

(五)实验五:生物样品中三聚氰胺快速检测——液相色谱法

1、实验类型:设计性实验与考核实验

2、实验学时数:8

3、实验目的

1了解三聚氰胺的理化性质、用途,掌握生物样品中三聚氰胺的提取和检测方法。

2掌握质控样品的制备,掌握标准曲线的设计方法与实验建立。

3掌握相对回收率、相对误差等分析方法验证参数的测定方法。

4、实验内容

1动物样品的前处理制备。

2质控样品的制备、处理。

3样品中三聚氰胺的提取、净化。

4色谱工作条件的建立。

5标准曲线绘制、样品中药物浓度的定量。

5、实验要求

1预习要求:查阅相关资料,根据药物结构分析样品前处理和测定的原理。

2实验设计要求:根据所用试药、试液,设计标准溶液配制方法、标准曲线浓度范围、标准曲线各浓度点的;根据最高残留限量、仪器分析方法特点、药、试液和样品基准特点,设计分析方法的定量限和检测限。

3实验操作要求:玻璃仪器的正确使用;量器具的正确使用;分析数据的正确处理。

4实验报告要求:实验报告书写规范;原始记录真实、准确;测定数据正确处理;测定结果与实际相符,并在规定的误差范围内。

5应在规定的时间内完成实验内容。

6、实验仪器设备

固相萃取装置、旋转蒸发仪、氮吹仪、高效液相色谱仪。

 

四、考核方式与方法

实验报告、实际操作。设计性实验:实验设计步骤、数据、报告情况。

五、实验指导教材与参考资料

1. 实验教材:自编

2.参考资料

1)吴永宁等.《兽药残留检测与监控技术》.北京:2002

2)李好枝主编.《体内药物分析》(第二版),.北京:中国医药科技出版社,2011,国家级规划教材

3)中华人民共和国农业部公告:兽药残留检测标准(现行)

4)国际食品法典委员会(CAC)公告、《食品中兽药残留最大限量和风险管理建议》

 

(撰写人:陈红       审核人: